Diabetologia：激活但功能受损的记忆Tregs在1型肝炎患者进展缓慢的过程中逐渐扩展

从第一次注意到人体内自身HIV到注意到1型式心血管疾病针灸症状的成果所部在儿童时期就有很好的详细描述，多个人体内自身HIVHIV的儿童之前有70%在小鼠叠加后10年内肺结核心血管疾病，而随访15年的儿童这一比率降低到84%。相对之下，占针灸1型式心血管疾病一半以上的型式1型式心血管疾病的得病机制还无法得到充份的生物信息学。

更加多的人开始采用应于系统对来定义1型式心血管疾病的成果：生物体在注意到多种人体内自身HIV时转回第1收尾，注意到血糖亦然度时转回第2收尾，注意到症状时转回第3收尾。一些多发人体内自身HIVHIV的生物体，在1期和2期，成果速度快，并发展为得病的1型式心血管疾病。我们之前详细描述了一一组在首次检测到多种人体内自身HIV样本后至亦然少10年无心血管疾病的亦然慢速成果者，这一组病变人数亦然少，但相似性非常明确。随后，我们发现人体内自身复合物酪氨酸CD8+T蛋白质化学反应在成果快速的病变之前基本不共存，但在近期得病和长期以来共存的心血管疾病病变之前很容易检测到。这或许表明，与成果病变相对，这些病变免疫化学反应的调节增强。

早期生物信息学表明，尽管调节性T蛋白质(Treg)数量正常，但心血管疾病病变共存一些功用瑕疵，其之前都有对IL-2的化学反应能力减小。此外，心血管疾病病变之前的effectCD4+T蛋白质或许对调节更具抵抗性，展现为effectT蛋白质的诱发减弱，自然环境转化成的Treg和游离转化成的诱导Treg，以及复合物经历的CD4+T蛋白质之前IL-2化学反应减弱。本生物信息学的借此是详细描述了CD4+调节性T蛋白质(Treg)在群集亦然快速成果者之前的相似性，他们的平均年龄组为43岁(31-72岁)，随访时长为18-32年。

法则：BOX生物信息学是一项以人群依此的主干生物信息学，在21岁表列出患病的病变亲人之前检查1型式心血管疾病的小心诱因。我们之前详细描述了长期以来快速成果者的相似性，他们保持多重人体内自身HIVHIV超过10年，但无法注意到心血管疾病的针灸症状，慢速性或非透过性免疫。随后，10名继续保持无心血管疾病并不想给予大量尿液样本的快速成果者纳入T和B蛋白质功用量化。在目前的生物信息学之前，8名慢速成果者(SP一组)，之前位年龄组43岁(31-72岁)，18 - 32岁错综复杂的人体内自身HIVHIV。所有的旁观者都位处1型式心血管疾病成果的1期，尽管一些人随后失掉了人体内自身HIV对某些复合物的HIV化学反应，然而，一名病变已经位处2期至亦然少6年，但无法注意到针灸症状，一名病变被病症为心血管疾病，该受试者72岁，在挖掘出试验中样本时，其HbA1c增大到53 mmol/mol(7%)，在数据量化之前对该NADP透过了单独评核。分离外周血单个核蛋白质(PBMCs)，采行多参数流式蛋白质法术和T蛋白质诱发试验中评核NADP之前Treg的频谱、变异式和功用。采用FlowSOM和CITRUS(聚类核对、表征和回归)透过无督导聚类量化，评核Treg变异式。

结果：与肥胖NADP相对，来自慢速成果体的知觉CD4+T蛋白质的督导聚类推断，需要的话的知觉CD4+ Treg频谱降低，与糖皮质激素诱导的TNFR涉及蛋白质(GITR)声称降低有关。一名HbA1c增大的病变与成果快速者和意味着的对照一组相对，Treg谱有所各有不同。功用量化表明，与肥胖NADP相对，来自快速成果体的Treg介导的CD4+effectT蛋白质诱发明显受损。展现为对effectCD4+T蛋白质CD25和CD134声称的诱发降低。

平面图1 集中的变异式量化推断，CD4+Treg甲型式在慢速成果表头之前降低。由FlowSOM转化的Treg室，聚集在来自所有NADP的活CD4+CD45RA -蛋白质上。根据标有物声称核对出10个元簇:知觉T蛋白质_1;知觉T cell_2;知觉T cell_3;知觉T cell_4;CD49b知觉T蛋白质;HLA-DR + GITR +知觉T蛋白质;文件系统对Treg_1;文件系统对Treg_2;文件系统对Treg_3;和文件系统对Treg_4。(a)采用9个各有不同Treg标有转化的10个元簇的MST。每个数据流亦然一个集群(100个集群)，相当大的元集群(10个元集群)在数据流一组周围上色。每个数据流之前的煎饼平面图声称单个标有的声称高至。(b)每个元聚类的热平面图，以推断结构上标有声称。(c, d)为HD一组(c)和SP一组(d)转化平面图，以及FlowSOM鉴别的每个元簇的覆盖层。(e-l)相对稀土元素为每个metacluster木箱线或平面图(稀土元素> 0.05%)已确定为HD和SP一组:文件系统对Treg_2 (e),文件系统对Treg_3 (f),文件系统对Treg_4 (g), HLA-DR + GITR +知觉T蛋白质(h)、知觉T cell_1(i),知觉T cell_2 (j),知觉T cell_3 (k) n d CD49b知觉T蛋白质(l)。黄色格三子亦然**SP 606。**p< 0.01, Wilcoxon一组小写字母秩检验。此键适用于平面图形部分(a)， (c)， (d)和d (e-l)

平面图2 采用CITRUS的系统结构式证实，Treg频谱的降低是成果快速的标志。分级暂时性(a - f)和柑橘量化(g-k)比较SP旁观者和意味着的HD旁观者在CD4+CD45RA−T蛋白质上的差异。(a)互补CD25+ cd127 lotreg和CD25loCD127+T c e l人群的亦然性平面图。CD25+ cd127lotreg被CD39和FOXP3富集，然后通过HLA-DR和GITR声称透过分离，模拟FlowSOM人群。(b) HD(黑点)和SP(黑斑)一组以及NADPSP 606(黄色)之前CD25+ cd127的频谱汇总平面图。(c-f) CD25+CD127loCD39+FOXP3+和CD25loCD127+暂时性空集的木箱线或平面图;(c) HLA-DRloGITR−(文件系统对Treg_2)， (d) HLA-DRintGITRlo(文件系统对Treg_3)， (e) HLA- d RhiGITR+(文件系统对Treg_4)， (f) HLA- d RhiGITR+(HLA-DR+GITR+文件系统对T cell)。(g - i)柑桔簇折叠由(g) CD127， (h) CD25和(i) FOXP3声称风速着色，箭头醒目的簇被鉴别为SP和HD表头错综复杂的各有不同。(j)木箱线或平面图推断了在SP(黑斑)和HD(灰点)一组之前，CITRUS知觉Treg_3和Treg_4的相对稀土元素(比率)。(k)直方平面图推断每个簇的变异式(粉色)和Treg标有相对声称与氛围声称(紫色);上列，文件系统对Treg_3;请注意偷偷地，文件系统对Treg_4。氛围与所有其他簇之前标有的声称有关。*p< 0.05， **p< 0.01, Wilcoxon一组小写字母秩检验

平面图3 与肥胖献血者相对，成果快速者知觉treg的GITR降低。每个知觉CD4+T蛋白质元簇(知觉T蛋白质_1;知觉T cell_2;知觉T cell_3;CD49b +知觉T蛋白质;HLA-DR + GITR +知觉T蛋白质;文件系统对Treg_2;文件系统对Treg_3;来自FlowSOM的memory Treg_4)检测每个声称标有的变化。(a,b)来自HD (a)和S (b)表头的声称热平面图(sp606不都有在内)。(c,d)知觉Treg_4元簇之前所有HD(灰色)、所有SP(紫色)和SP 606(黄色)的FlowSOM GITR声称串联，推断直方平面图(c)和汇总平面图(d)。Wilcoxon一组小写字母秩和检验，p< 0.07(黄色)所有NADP都有，p< 0.05(紫色)NADPSP 606和意味着的HD不都有在测试之前。(e,f) HLA-DRhiGITR+Tregs之前GITR声称，从分级暂时性，从所有HD(灰色)、所有SP(紫色)和SP 606(黄色)串联，推断直方平面图(e)和汇总平面图(f) *p< 0.05, Wilcoxon一组小写字母秩检验

平面图4 来自快速成果的CD4+ treg蛋白质控制effectCD4+T蛋白质的能力减小。SP一组用紫色的线或和格三子声称，HD一组用紫色的线或和格三子声称，黄色的线或/格三子声称NADPsp606。采用CD4+CD25+ Treg分选试剂盒对CD4+T蛋白质透过分选。CD4+CD25−(需要的话者)被标有为CFSE, Treg按观察的比率滴定。用抗CD3 /28微珠重置蛋白质，培育3当晚透过流式蛋白质法术检测。(a-d)与CD4+需要的话者相对应的treg培育(免疫)(e-h) HD、SP或SP 606 Treg与HD需要的话者培育。(a,b,f) CFSE增生(a,e)和CFSE诱发多于(b,f)。(c, d,h) CD25 (c,g)和CD134 (d,h)的诱发多于。采用HIV对照(需要的话的积极响应蛋白质下同treg)计算诱发多于。*p< 0.05， **p< 0.01， ***p< 0.001，重复测量双向方差量化。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

平面图5 effectCD4+T蛋白质对快速成果的T蛋白质重置的诱发更敏感。SP一组用紫色的线或和格三子声称，HD一组用紫色的线或和格三子声称，黄色的线或/格三子声称NADPsp606。采用CD4+CD25+Treg分选试剂盒对CD4+T蛋白质透过分选。CD4+CD25−(需要的话者)被cfsel标有，treg按观察的比率滴定。用抗CD3 /28微珠重置蛋白质，培育3当晚透过流式蛋白质法术(CD25反染)和蛋白质因三子量化。HD Treg与HD、SP或sp606需要的话者都由培育。(a,b) CFSE增生(a)和CFSE诱发百分所部(b)。(c,d) CD25诱发百分所部(c)和CD134诱发百分所部(d)。(e,f) IFN-γ(e)和IL-17A (f)在浙大之前的声称。***p< 0.001， **p< 0.01，重复测量双向方差量化。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

论证：我们得出的论证是，来自快速成果三子的重置知觉CD4+Treg在GITR声称之前得到了扩展和丰富，特别强调了全面生物信息学Treg在1型式心血管疾病或许会生物体之前的异质性的更全面。

原文原文：

Boldison J, Long AE, Aitken RJ,et al.Activated but functionally impaired memory Tregs are expanded in slow progressors to type 1 diabetes.Diabetologia 2021 Oct 28